22.09. bis 24.09.2011, Düsseldorf-Kaiserswerth
CC Chemokin ligand 18 (CCL18) induziert Chemotaxis und phenotypische Ver�nderungen bei der Lungenkarzinomzelllinie A549
Ploenes T
Scholtes B
Passlick B
Zissel G
Till Ploenes - Universit�tsklinikum Freiburg, Thoraxchirurgie, Freiburg im Breisgau
Ben Scholtes - Universit�tsklinikum Freiburg, Thoraxchirurgie, Freiburg im Breisgau
Bernward Passlick - Universit�tsklinikum Freiburg, Thoraxchirurgie, Freiburg im Breisgau
Gernot Zissel - Universit�tsklinikum Freiburg, experimentelle Pneumologie, Freiburg
Deutsche Gesellschaft f�r Thoraxchirurgie. 20. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft f�r Thoraxchirurgie. D�sseldorf, 22.-24.09.2011.
© 2011 Ploenes et al.
Zielsetzung: Chemokine beeinflussen Tumorwachstum und Metastasierung. In Vorarbeiten konnte bereits gezeigt werden, dass das Chemokin CCL18 im Serum von Patienten mit Nicht-kleinzelligem Lungenkarzinom entsprechend dem T-Stadium erh�ht ist. In der hier vorliegenden Arbeit wurde der Einfluss von CCL18 bei einer Adenokarzinomzelllinie der Lunge (A549) untersucht.
Methodik: Die A549 Zellen wurden 24h bzw. 72h unter verschieden Konzentrationen von CCL18 (1 ng/ml–10 ng/ml–100 ng/ml) kultiviert. Als Kontrolle diente jeweils TGF-β in der Konzentration 2 ng/ml. Phenotypische Ver�nderungen wurden photographisch nach 24 h und 72 h dokumentiert. In weiteren Experimenten wurde die chemotaktische Wirkung von CCL18 in einer Boydenkammer in den bereits angegebenen Konzentrationen gemessen. Die Proliferationsrate wurde mittels Einbau des Thymidin-Analogons BrdU in die DNA und anschlie�ender photometrischen Bestimmung mit Hilfe eines Peroxidase-gekoppelten anti-BrdU-Antik�rpers ebenfalls in den angegebenen CCL18-Konzentrationen bestimmt.
Ergebnisse: Es zeigte sich bereits nach 24h, sowohl bei der Kontrolle als auch bei den CCL18 exponierten Zellen eine deutlicher Ver�nderung des epithelialen Phenotyps hin zu einem spindelf�rmigen, mesenchymalen Phenotyp. CCL18 induziert dosis-abh�ngig die Chemotaxis von A549 Zellen. Ohne Chemokinzugabe fanden wir nach der entsprechenden Inkubationszeit 8 Zellen/Gesichtsfeld, w�hrend bei der Kontrolle mit TGF-β 12 Zellen/Gesichtsfeld migrierten. Bei Zugabe von CCL18 zeigten sich entlang der steigenden Konzentrationen 8 Zellen/Gesichtsfeld, 12 Zellen/Gesichstfeld und 15 Zellen/Gesichtsfeld. Die Proliferation von A549 war unter TGF-β um 40% reduziert. Wurde CCL18 (100 ng/ml) zugegeben wurde die Proliferation ebenfalls um 40% reduziert.
Schlussfolgerung: Es zeigt sich eine eindeutige zellmorphologische Ver�nderung unter CCL18. Die Zellen ver�nderten sich vom epithelialen zum mesenchymalen Subtyp. Die Proliferationsrate wurde von CCL18 deutlich reduziert. Zus�tzlich zeigte sich eine stark chemotaktische Wirkung von CCL18, welche dosisabh�ngig war. Damit kann geschlussfolgert werden, dass CCL18 ebenso wie TGF-β wichtige Schritte der Metastasierung beeinflusst.